칼슘 이미징을 위한 최적의 조명

칼슘 이미징을 위한 최적의 조명

Ratiometric 칼슘 이미징을 위한 신속한 제어가 가능한 LED 조명 시스템인 pE-340 ^fura

최근까지, Fura-2 이미징에 사용된 조명 시스템의 응답 시간은 아크 램프 및 모노크로메타 시스템에서 파장의 기계적 스위칭으로 인해 밀리초로 제한되었습니다. LED 기술의 본질적인 μs 스위칭 속도를 활용하여, 칼로리 반응은 24.4 Hz에서 기록되었으며, 사용된 카메라에 의해 제한되어, 해마 뉴런에서 시냅스 중심의 개별 칼슘 이벤트가 기존의 모노 크로 미터 측정 기술로 해결할 수 없음을 나타냅니다.

모노크로메타 기반 시스템에서 아크 램프 드리프트 불안정성은 상당한 수준의 실험 소음을 제공하여 모든 측정의 정확성을 감소시킵니다. Fura-2 염료의 여기 파장과 정확하게 일치하는 340/380 nm LED 기반 시스템을 사용하여 최소한의 실험 정밀도가 Fura-2 염료의 이론적 정밀도보다 낮았다. 결과적으로, 측정은 광학 시스템보다는 염료의 정밀도에 의해 근본적으로 제한되었습니다.

새로운 LED 조명 시스템을 사용하면 동일한 측정된 칼슘 농도와 우수한 신호 대 잡음비를 유지하면서 4 배 적은 Fura-2 염료를 세포에 로드 할 수 있습니다. 필요한 염료의 4 배 감소는 염료 독성 감소로 인한 세포 생존력을 향상시킬뿐만 아니라 실험당 비용 절감 효과를 가져옵니다.

위의 요소를 결합한 새로운 340/380 nm LED 조명 장치는 Fura-2 기반 칼슘 이미징에 최적의 여기 파장을 제공하여 비디오 레이트 시간 분해능으로 고정밀, 안정적, 고 처리량 이미징을 가능하게합니다.